肾上腺皮质抗体ELISA试剂盒工作原理的具体步骤分析
更新时间:2024-04-22 点击次数:36次
肾上腺皮质抗体ELISA试剂盒是一种用于检测血液中肾上腺皮质抗体(AdrenalCortexAntibodies,ACA)的实验室诊断工具。这种抗体的存在通常与自身免疫性疾病有关,如自身免疫性Addison病(也称为原发性肾上腺皮质功能减退症)。在这些疾病中,免疫系统错误地攻击并破坏肾上腺皮质组织,导致激素分泌不足。
1.预涂有抗原的微孔板:这些微孔板被涂覆有特定的肾上腺皮质抗原,用于捕获样品中的相应抗体。
2.阳性和阴性对照:用于确保实验的有效性和准确性。
3.洗涤缓冲液:用于清洗微孔板,以去除未结合的物质。
4.样本稀释液:用于稀释待测血清样本。
5.停止溶液:用于终止酶反应,使颜色稳定。
6.底物溶液:含有酶标记,用于产生颜色反应。
7.抗体-酶标记物:通常是与酶(如过氧化物酶或碱性磷酸酶)结合的抗人抗体,用于检测和放大信号。
8.密封条带:用于在孵化过程中封闭微孔板。
9.说明书:提供详细的实验步骤和解读结果的指南。
肾上腺皮质抗体elisa试剂盒的工作原理:
1.样本准备:将待测血清样本用样本稀释液稀释至适当浓度。
2.孵化:将稀释后的样本加入预涂有抗原的微孔板中,孵化一定时间,使抗体与抗原结合。
3.洗涤:去除未结合的物质,只留下特异性结合的抗体。
4.添加抗体-酶标记物:加入与抗体结合的酶标记物,形成抗原-抗体-酶标记物复合物。
5.再次洗涤:去除多余的酶标记物。
6.添加底物溶液:加入底物后,酶标记物催化底物产生颜色反应。
7.停止反应:加入停止溶液,终止颜色发展。
8.读数:使用酶标仪测量各孔的光密度值(OD值),颜色的深浅与样本中抗体的浓度成正比。